File:Blue-white test.jpg
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![File:Blue-white test.jpg](https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/c5/Blue-white_test.jpg/600px-Blue-white_test.jpg?20100113170519)
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Légendes
Légendes
Description
[modifier]DescriptionBlue-white test.jpg |
English: Blue-white screening is a popular and efficient molecular biology technique for the identification of recombinant bacteria in cloning experiments.
It relies on the activity of the enzyme β-galactosidase (β-gal), naturally occurring enzyme in E. coli cells, which cleaves lactose molecules into glucose and galactose. β-gal is encoded by the lacZ gene in the bacterial chromosome. There is also the M15 strain of E. coli with a deletion mutation of a fragment of the Lac gene that produces an inactive β-gal (called ω-peptide).
Due to α-complementation process, E. coli strains with lacZΔM15 deletion mutation that carries the plasmid vector containing the lacZα sequence can produce the functional β-gal enzyme.
For screening the clones with recombinant DNA, X-gal, Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) along with an antibiotic (such as ampicillin) is added to the medium. X-gal is a chromogenic substrate, and IPTG is a galactose analog that induces lacZ gene expression.
The plasmid vector is designed to contain multiple cloning site (MCS) is present within the lacZ sequence. Consequently, in the plasmid with an insert (foreign DNA), α-complementation does not occur, thus a functional β-galactosidase enzyme is not formed. Blue colonies contain E. coli producing a functional enzyme that hydrolyzes X-gal, resulting in an insoluble blue pigment. In other words, these are bacteria without the insert that have a a functional LacZ gene. White colonies are formed when a plasmid vector containing insert with foreign DNA (which disrupts the lacZ gene) is taken up by the E. coli, α-complementation does not occur, and therefore the functional enzyme β-gal is not produced. Next, the desired white recombinant colonies can be easily selected and cultured. The presence of the antibiotic in the medium ensures that only E.coli containing a plasmid-borne antibiotic-resistance gene (eg. ampR selectable marker) can grow at all.Polski: Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. |
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Date | |||
Source | Travail personnel | ||
Auteur | Stefan Walkowski | ||
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Date et heure | Vignette | Dimensions | Utilisateur | Commentaire | |
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actuel | 13 janvier 2010 à 17:05 | ![]() | 800 × 800 (288 kio) | Navaho (d | contributions) | {{Information |Description={{en|1=Blue white screen. Agar plate with blue and white bacterial colonies.}} {{pl|1=Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. }} |Source={{own}} |Author=Navaho |
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Fabricant de l’appareil photo | Panasonic |
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Modèle de l’appareil photo | DMC-FZ30 |
Durée d’exposition | 1/80 s (0,0125 s) |
Ouverture focale | f / 2,8 |
Sensibilité ISO (vitesse d’obturation) | 400 |
Date et heure de génération des données | 17 décembre 2009 à 13:19 |
Longueur focale de la lentille | 7,4 mm |
Orientation | Normale |
Résolution horizontale | 72 pt/po |
Résolution verticale | 72 pt/po |
Logiciel utilisé | Adobe Photoshop CS4 Windows |
Date de modification du fichier | 13 janvier 2010 à 17:23 |
Positionnement YCbCr | Co-situé |
Programme d’exposition | Réglage manuel |
Version d’EXIF | 2.2 |
Date et heure de la numérisation | 17 décembre 2009 à 13:19 |
Mode de compression de l’image | 4 |
Biais de compensation d’exposition APEX | 0 |
Ouverture maximale interne de la lentille | 3 APEX (f / 2,83) |
Mode de mesure | Motif géométrique |
Source de lumière | Flash |
Flash | Flash non déclenché, suppression du flash obligatoire |
Espace colorimétrique | sRGB |
Type de capteur | Capteur de couleur à une puce |
Rendu d’image personnalisé | Procédé normal |
Mode d’exposition | Exposition manuelle |
Balance des blancs | Balance des blancs manuelle |
Taux de zoom numérique | 0 |
Longueur focale pour un film 35 mm | 35 mm |
Type de capture de la scène | Standard |
Contraste | Normal |
Saturation | Normale |
Netteté | Normale |