File:Blue-white test.jpg
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說明
摘要
[編輯]描述Blue-white test.jpg |
English: Blue-white screening is a popular and efficient molecular biology technique for the identification of recombinant bacteria in cloning experiments.
It relies on the activity of the enzyme β-galactosidase (β-gal), naturally occurring enzyme in E. coli cells, which cleaves lactose molecules into glucose and galactose. β-gal is encoded by the lacZ gene in the bacterial chromosome. There is also the M15 strain of E. coli with a deletion mutation of a fragment of the Lac gene that produces an inactive β-gal (called ω-peptide).
Due to α-complementation process, E. coli strains with lacZΔM15 deletion mutation that carries the plasmid vector containing the lacZα sequence can produce the functional β-gal enzyme.
For screening the clones with recombinant DNA, X-gal, Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) along with an antibiotic (such as ampicillin) is added to the medium. X-gal is a chromogenic substrate, and IPTG is a galactose analog that induces lacZ gene expression.
The plasmid vector is designed to contain multiple cloning site (MCS) is present within the lacZ sequence. Consequently, in the plasmid with an insert (foreign DNA), α-complementation does not occur, thus a functional β-galactosidase enzyme is not formed. Blue colonies contain E. coli producing a functional enzyme that hydrolyzes X-gal, resulting in an insoluble blue pigment. In other words, these are bacteria without the insert that have a a functional LacZ gene. White colonies are formed when a plasmid vector containing insert with foreign DNA (which disrupts the lacZ gene) is taken up by the E. coli, α-complementation does not occur, and therefore the functional enzyme β-gal is not produced. Next, the desired white recombinant colonies can be easily selected and cultured. The presence of the antibiotic in the medium ensures that only E.coli containing a plasmid-borne antibiotic-resistance gene (eg. ampR selectable marker) can grow at all.Polski: Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. |
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日期 | |||
來源 | 自己的作品 | ||
作者 | Stefan Walkowski | ||
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日期/時間 | 縮圖 | 尺寸 | 使用者 | 備註 | |
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目前 | 2010年1月13日 (三) 17:05 | 800 × 800(288 KB) | Navaho(留言 | 貢獻) | {{Information |Description={{en|1=Blue white screen. Agar plate with blue and white bacterial colonies.}} {{pl|1=Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. }} |Source={{own}} |Author=Navaho |
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詮釋資料
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相機製造商 | Panasonic |
---|---|
相機型號 | DMC-FZ30 |
曝光時間 | 1/80 秒 (0.0125) |
光圈值 | f/2.8 |
ISO 速率 | 400 |
資料產生的日期時間 | 2009年12月17日 (四) 13:19 |
焦距 | 7.4毫米 |
方位 | 標準 |
水平解析度 | 72 dpi |
垂直解析度 | 72 dpi |
使用軟體 | Adobe Photoshop CS4 Windows |
檔案修改日期時間 | 2010年1月13日 (三) 17:23 |
亮度與彩度位置 | 同時取樣 |
曝光模式 | 手動 |
Exif 版本 | 2.2 |
數位化的日期時間 | 2009年12月17日 (四) 13:19 |
影像壓縮模式 | 4 |
APEX 曝光補償 | 0 |
最大陸地光圈 | 3 APEX(f/2.83) |
測光模式 | 模式 |
光源 | 閃光燈 |
閃光燈 | 閃光燈未開啟、強制閃光燈關閉 |
色彩空間 | sRGB |
感光模式 | 單晶片彩色區域感測器 |
自訂影像處理 | 一般程序 |
曝光模式 | 手動曝光 |
白平衡 | 手動白平衡 |
數位變焦比率 | 0 |
35 毫米膠片焦距 | 35毫米 |
場景拍攝類型 | 標準 |
對比度 | 標準 |
飽和度 | 標準 |
銳利度 | 標準 |