File:Blue-white test.jpg
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[编辑]描述Blue-white test.jpg |
English: Blue-white screening is a popular and efficient molecular biology technique for the identification of recombinant bacteria in cloning experiments.
It relies on the activity of the enzyme β-galactosidase (β-gal), naturally occurring enzyme in E. coli cells, which cleaves lactose molecules into glucose and galactose. β-gal is encoded by the lacZ gene in the bacterial chromosome. There is also the M15 strain of E. coli with a deletion mutation of a fragment of the Lac gene that produces an inactive β-gal (called ω-peptide).
Due to α-complementation process, E. coli strains with lacZΔM15 deletion mutation that carries the plasmid vector containing the lacZα sequence can produce the functional β-gal enzyme.
For screening the clones with recombinant DNA, X-gal, Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) along with an antibiotic (such as ampicillin) is added to the medium. X-gal is a chromogenic substrate, and IPTG is a galactose analog that induces lacZ gene expression.
The plasmid vector is designed to contain multiple cloning site (MCS) is present within the lacZ sequence. Consequently, in the plasmid with an insert (foreign DNA), α-complementation does not occur, thus a functional β-galactosidase enzyme is not formed. Blue colonies contain E. coli producing a functional enzyme that hydrolyzes X-gal, resulting in an insoluble blue pigment. In other words, these are bacteria without the insert that have a a functional LacZ gene. White colonies are formed when a plasmid vector containing insert with foreign DNA (which disrupts the lacZ gene) is taken up by the E. coli, α-complementation does not occur, and therefore the functional enzyme β-gal is not produced. Next, the desired white recombinant colonies can be easily selected and cultured. The presence of the antibiotic in the medium ensures that only E.coli containing a plasmid-borne antibiotic-resistance gene (eg. ampR selectable marker) can grow at all.Polski: Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. |
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日期 | |||
来源 | 自己的作品 | ||
作者 | Stefan Walkowski | ||
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日期/时间 | 缩略图 | 大小 | 用户 | 备注 | |
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当前 | 2010年1月13日 (三) 17:05 | ![]() | 800 × 800(288 KB) | Navaho(留言 | 贡献) | {{Information |Description={{en|1=Blue white screen. Agar plate with blue and white bacterial colonies.}} {{pl|1=Test blue-white. Płytka agarowa z wyrośniętymi białymi i niebieskimi koloniami E. coli. }} |Source={{own}} |Author=Navaho |
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元数据
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相机制造商 | Panasonic |
---|---|
相机型号 | DMC-FZ30 |
曝光时间 | 1/80秒(0.0125) |
光圈值 | f/2.8 |
感光度(ISO) | 400 |
数据生成日期时间 | 2009年12月17日 (四) 13:19 |
镜头焦距 | 7.4毫米 |
方向 | 正常 |
水平分辨率 | 72 dpi |
垂直分辨率 | 72 dpi |
使用软件 | Adobe Photoshop CS4 Windows |
文件修改日期时间 | 2010年1月13日 (三) 17:23 |
亮度(Y)和色度(C)位置 | 重叠 |
曝光程序 | 手动 |
Exif版本 | 2.2 |
数字化日期时间 | 2009年12月17日 (四) 13:19 |
图像压缩模式 | 4 |
APEX曝光补偿 | 0 |
最大光圈 | 3 APEX(f/2.83) |
测光模式 | 多区 |
光源 | 闪光灯 |
闪光灯 | 闪光灯未点亮、闪光灯强制关闭 |
色彩空间 | sRGB |
感光方法 | 单芯片彩色区域传感器 |
自订图像处理 | 普通处理 |
曝光模式 | 手动曝光 |
白平衡 | 手动白平衡 |
数字变焦比率 | 0 |
35毫米胶片焦距 | 35毫米 |
场景拍摄类型 | 标准 |
对比度 | 标准 |
饱和度 | 标准 |
锐度 | 标准 |